隨著動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在組織學(xué)與胚胎學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、腫瘤學(xué)、免疫學(xué)、營養(yǎng)學(xué)、藥理學(xué)、毒理學(xué)等學(xué)科的廣泛應(yīng)用,促使細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的普及已成為一種可能。目前,有許多基層科研機(jī)構(gòu)正在建立動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室,現(xiàn)就細(xì)胞培養(yǎng)室的硬件建設(shè)談點(diǎn)看法,供參考。
1 總體原則
1.1 凈、污分流 細(xì)胞培養(yǎng)室與相關(guān)輔助用房必須分開。培養(yǎng)室內(nèi)環(huán)境要求清潔、空氣清新、無塵、干燥。
1.2 布局合理,方便操作 所有實(shí)驗(yàn)室的布局要求統(tǒng)一、協(xié)調(diào),最好相鄰,以利于工作;室內(nèi)各項(xiàng)設(shè)備安排要緊湊,節(jié)省空間,方便工作,避免交叉干擾。
2 細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室
2.1 準(zhǔn)備室 主要用于培養(yǎng)器皿的洗滌、消毒、培養(yǎng)物的準(zhǔn)備和物資保存等。為避免相互間不必要的生物或化學(xué)污染,可以數(shù)間小室組成為佳;準(zhǔn)備室應(yīng)具備良好的通風(fēng)和采光,但應(yīng)避免灰塵污染。
2.1.1 洗滌區(qū) 設(shè)有水槽、洗滌池,地面應(yīng)設(shè)置地漏,以利水漬快速干燥。
2.1.2 消毒區(qū) 供物品和器械消毒及烘干用,常用消毒方法有干熱法和濕熱法。因設(shè)備耗電量大、產(chǎn)熱量高,應(yīng)單獨(dú)配備供電線路。
2.1.3 制水區(qū) 用于制備符合實(shí)驗(yàn)要求的清潔水,以供洗滌培養(yǎng)器具和配制培養(yǎng)液用。要求供、排水方便。
2.1.4 控溫設(shè)備區(qū) 主要放置冰箱、低溫冷藏箱、培養(yǎng)箱等設(shè)備,以保存實(shí)驗(yàn)室內(nèi)需低溫保存的物品,如細(xì)胞株、某些試劑、酶、培養(yǎng)基、配制好的溶液及供實(shí)驗(yàn)室內(nèi)常規(guī)培養(yǎng)和孵化胚胎等需要。
2.1.5 精密儀器區(qū) 主要放置電子天平、酶標(biāo)儀、分光光度計(jì)等設(shè)備。要求工作臺(tái)有較好的水平度、有較高的抗震能力、環(huán)境溫濕度變化小、無塵等。
2.2 培養(yǎng)室
2.2.1 緩沖間 常設(shè)于培養(yǎng)室外,要求清潔、干燥和不通風(fēng),并設(shè)置紫外燈等必要的環(huán)境消毒設(shè)備。
2.2.2 培養(yǎng)室 常稱無菌室,是專門用于進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)和各種無菌操作的實(shí)驗(yàn)室,要求清潔、干燥、無菌、不通風(fēng)。室內(nèi)除放置CO2培養(yǎng)箱、超凈臺(tái)、倒置鏡、水浴搖床、離心機(jī)和冰箱等設(shè)備外,還應(yīng)有放置無菌器具的櫥柜和一定的操作空間。
2.3 其他實(shí)驗(yàn)室 根據(jù)研究方向可配套建立諸如細(xì)胞遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)室、細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室、分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室、電生理實(shí)驗(yàn)室、生化實(shí)驗(yàn)室、形態(tài)學(xué)工作室等。
3 配備儀器設(shè)備
3.1 超凈工作臺(tái) 是目前普遍應(yīng)用的無菌操作裝置。按氣流方向的不同可分為水平流和垂直流二種,以垂直流超凈臺(tái)較為常用,氣流從上向下流動(dòng),形成氣流屏障,能較好地保持臺(tái)面無菌和操作條件。
3.2 控溫設(shè)備 主要指CO2培養(yǎng)箱、三氣(O2、N2、CO2)培養(yǎng)箱、隔水式電熱恒溫培養(yǎng)。
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