PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)要點(diǎn)及院感管理
更新時(shí)間：2022-04-13 17:35:20瀏覽次數(shù)：0
根據(jù)聯(lián)防聯(lián)控機(jī)制綜發(fā)[2020]181號(hào)文件要求：“各地要加強(qiáng)三級(jí)醫(yī)院、傳染病?？漆t(yī)院、縣（區(qū)）級(jí)及以上疾控機(jī)構(gòu)、海關(guān)及有條件的縣醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室建設(shè)，使其具備開展新冠病毒檢測(cè)能力”。各醫(yī)院都在進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)工作，其中發(fā)現(xiàn)存在一些問(wèn)題。PCR實(shí)驗(yàn)室應(yīng)相對(duì)獨(dú)立，盡量避免與其他普通實(shí)驗(yàn)套疊或者有通道上的交叉。我們看過(guò)一個(gè)圖，他們的PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)置在檢驗(yàn)科的最里面，醫(yī)廢和標(biāo)本的運(yùn)送要穿過(guò)檢驗(yàn)科的整個(gè)走廊，這種情況人流、物流、污物均在同一個(gè)通道，交叉感染風(fēng)險(xiǎn)較高，應(yīng)盡量避免。PCR實(shí)驗(yàn)室應(yīng)設(shè)置以下區(qū)域：試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。這個(gè)4個(gè)區(qū)域在物理空間上必須完全獨(dú)立，各區(qū)域無(wú)論是空間上還是在使用中，應(yīng)當(dāng)始終處于完全的分割狀態(tài)，不能有空氣的直接相通。根據(jù)使用儀器的功能，區(qū)域可以適當(dāng)合并。每個(gè)區(qū)域間設(shè)置傳遞窗，要求一側(cè)打開時(shí)另一側(cè)無(wú)法打開。4個(gè)區(qū)域應(yīng)設(shè)置獨(dú)立的緩沖間，應(yīng)設(shè)置可以通到四個(gè)操作區(qū)域的PCR走廊，在進(jìn)入各區(qū)域前，應(yīng)設(shè)置更衣間，每個(gè)區(qū)域的衣服可用不同顏色進(jìn)行區(qū)分，在清潔區(qū)應(yīng)設(shè)置洗澡間、衛(wèi)生間、值班室。還應(yīng)考慮到醫(yī)廢和標(biāo)本的運(yùn)送通道。PCR實(shí)驗(yàn)室并沒有嚴(yán)格的凈化要求，但是為了避免各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域間交叉感染的可能性，通風(fēng)方式應(yīng)為機(jī)械通風(fēng)，不應(yīng)自然通風(fēng)，且不宜使用循環(huán)風(fēng)。同時(shí)要嚴(yán)格控制送、排風(fēng)比例以保證各試驗(yàn)區(qū)的壓力要求。PCR實(shí)驗(yàn)室的空氣流向應(yīng)按照試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)進(jìn)行，防止擴(kuò)增的產(chǎn)物順空氣氣流進(jìn)入擴(kuò)增前的區(qū)域?？蛇x擇負(fù)壓排風(fēng)裝置，核心區(qū)域相對(duì)于相鄰區(qū)域最小壓不小于-10Pa。也可通過(guò)安裝排氣扇或者其他方式實(shí)現(xiàn)。PCR實(shí)驗(yàn)室要求溫度18~26℃，相對(duì)濕度30%~70%。1.進(jìn)入各工作區(qū)域應(yīng)當(dāng)按照單一方向進(jìn)行，即試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。2.各區(qū)域的設(shè)備、清潔用具標(biāo)記明確，不得混用。3.各區(qū)域的衣服用不同顏色標(biāo)記，離開各區(qū)域時(shí)不得將工作服帶出。4.試驗(yàn)臺(tái)用移動(dòng)式紫外線燈消毒，高度60-90cm。擴(kuò)增區(qū)延長(zhǎng)照射時(shí)間，最好是過(guò)夜照射。同時(shí)各區(qū)域還需安裝懸掛式紫外線燈管。5.各試驗(yàn)區(qū)盡量避免不必要的走動(dòng)和進(jìn)出，減少交叉感染風(fēng)險(xiǎn)。6.擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)可能會(huì)用到某些可致基因突變和有毒物質(zhì)，應(yīng)特別注意實(shí)驗(yàn)人員的安全防護(hù)。7.試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)：本區(qū)域?qū)毫]有明確要求，儲(chǔ)存試劑和用于標(biāo)本制作的消耗品等材料應(yīng)當(dāng)直接運(yùn)送至該區(qū)，不得經(jīng)過(guò)其他區(qū)域；試劑盒中的陽(yáng)性對(duì)照品及質(zhì)控品不應(yīng)當(dāng)保存在該區(qū)，應(yīng)保存在標(biāo)本處理區(qū)。8.標(biāo)本制備區(qū)：相對(duì)于臨近區(qū)域應(yīng)為正壓，以避免臨近區(qū)域進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染。9.擴(kuò)增區(qū)：相對(duì)于臨近區(qū)應(yīng)為負(fù)壓，為避免氣溶膠所致的污染，應(yīng)當(dāng)盡量減少在本區(qū)域內(nèi)的走動(dòng)。必須注意的是，所有經(jīng)過(guò)檢測(cè)的反應(yīng)管不得在此區(qū)域打開。10.擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)：相對(duì)于臨近區(qū)域應(yīng)為負(fù)壓。本區(qū)域是最主要的擴(kuò)增產(chǎn)物來(lái)源，因此必須注意避免通過(guò)本區(qū)域扥物品帶出。廢液必須收集至1mol/L的HCl中，并且不能在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)傾倒，而應(yīng)在遠(yuǎn)離實(shí)驗(yàn)室的地方倒掉。用過(guò)的吸頭也必須放至1mol/L的HCl中浸泡后再放到垃圾袋中按程序處理，如焚燒等。本區(qū)域需要配置高壓滅菌鍋用以滅活擴(kuò)增后的標(biāo)本。我們來(lái)看一個(gè)PCR實(shí)驗(yàn)室布局圖：
一些醫(yī)院的設(shè)計(jì)稿基本都是這個(gè)樣子。這個(gè)布局在院感上明顯的不符合“三區(qū)兩通道”的要求：只有污染區(qū)（四個(gè)操作間）、潛在污染區(qū)（PCR走廊）、沒有清潔區(qū)（洗澡間、值班室），沒有醫(yī)廢通道和標(biāo)本運(yùn)送通道，沒有更衣間來(lái)穿戴防護(hù)用品，穿脫防護(hù)用品、可復(fù)用防護(hù)用品的浸泡、清潔用具存放均在狹小的緩沖間進(jìn)行。各醫(yī)院的PCR實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)主要還是參考《醫(yī)療機(jī)構(gòu)基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室工作導(dǎo)則》（2010版），該導(dǎo)則重點(diǎn)強(qiáng)調(diào)了實(shí)驗(yàn)操作區(qū)域的設(shè)置，未考慮到感控的部分流程。因此，建議各醫(yī)院設(shè)計(jì)PCR實(shí)驗(yàn)室時(shí)還是需要感控專職人員提前介入，以免建好之后再改建，延長(zhǎng)工期、浪費(fèi)財(cái)力。最后還是要強(qiáng)調(diào)一下PCR實(shí)驗(yàn)室的終末消毒，這涉及到醫(yī)務(wù)人員的人身安全因此必需關(guān)注：
PCR實(shí)驗(yàn)室環(huán)境分區(qū)清潔
清潔區(qū)：辦公室和會(huì)議室等有窗戶的區(qū)域若無(wú)明顯污染，應(yīng)每天定期開窗通風(fēng)換氣數(shù)次，濕式清潔桌面、臺(tái)面和所有物體表面和地面至少1次。儲(chǔ)物室、培養(yǎng)室和試劑配制室等無(wú)窗戶的清潔區(qū)若無(wú)明顯污染，每天早晨濕式清潔桌面、臺(tái)面和地面至少1次。半污染區(qū)：定期進(jìn)行半污染區(qū)環(huán)境清潔消毒，每天工作結(jié)束后，物體表面、地面和空氣各清潔消毒1次。污染區(qū)：遇到污染情況隨時(shí)消毒，每天工作開始前及結(jié)束工作后，生物安全柜、實(shí)驗(yàn)室臺(tái)面、地面和空氣各消毒1次，廢棄標(biāo)本和實(shí)驗(yàn)污物應(yīng)分類進(jìn)行消毒滅菌處理；注：有人條件下，不得使用化學(xué)消毒劑進(jìn)行超低容量噴霧和紫外線燈空氣消毒。目前PCR實(shí)驗(yàn)室開展核酸檢測(cè)，僅靠人工進(jìn)行物體表面和環(huán)境的消毒耗費(fèi)了大量的人力和時(shí)間，因此空氣與物體表面聯(lián)合消毒，建議可以采用過(guò)氧化氫終末消毒系統(tǒng)，實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果顯示采用過(guò)氧化氫蒸汽對(duì)微生物實(shí)驗(yàn)室空氣進(jìn)行消毒時(shí)，H2O2 劑量為 7. 0 ml /m3和 10. 5 ml /m3 時(shí)消毒 30 min 后，符合空氣消毒的要求; 對(duì)微生物實(shí)驗(yàn)室工作臺(tái)面及墻面進(jìn)行消毒時(shí)，H2O2劑量 7. 0、10. 5 ml /m3 時(shí)，消毒 30 min 后符合物體表面消毒的要求。過(guò)氧化氫蒸汽對(duì)微生物實(shí)驗(yàn)室工作臺(tái)面、墻面等物體表面及空氣消毒效果較好，可以作為微生物實(shí)驗(yàn)室的綜合消毒或終末消毒方法使用。干霧化過(guò)氧化氫可有效殺滅實(shí)驗(yàn)室內(nèi)環(huán)境表面的微生物，設(shè)備自動(dòng)化程度高和效果一致性好，適用于物體和環(huán)境的終末消毒。由于其使用過(guò)氧化氫濃度較低、時(shí)間較短，可大大降低腐蝕或老化醫(yī)療設(shè)備的風(fēng)險(xiǎn)。免責(zé)聲明：文章來(lái)源于網(wǎng)絡(luò)，若有侵權(quán)，請(qǐng)聯(lián)系刪除
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